和光純薬工業株式会社試薬 [Laboratory Chemicals] 試験研究用試薬・抗体の製造販売および各種受託サービス
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低コストでのタンパク質精製に
6×ヒスチジン融合タンパク質の精製にご使用いただける担体です

Ni-NTA アガロース HP(High Performance)

Ni-アガロースは、6×ヒスチジン融合タンパク質をアフィニティー精製するために使用されます。
本品は、リガンドにニトリロ三酢酸(NTA)を用いており、金属イオンの脱落によるタンパク質純度の低下を抑えます。また、変性剤耐性を有し、FPLCにも対応しています。


リンク関係


特 長

  • 低コスト
  • 高い変性剤耐性
  • 高圧力対応

使用例・他社品比較データ

他社品と同等の性能を確認しています。

溶出画分



比較データ取得プロトコール

  1. 大腸菌に発現させた6×ヒスチジン融合GFPを超音波破砕法により回収する。
  2. 前処理を行い精製前サンプルを調製する。
  3. PBSで平衡化したレジン1mLを精製前サンプルに添加し、バッチ法にて反応(4℃、1時間)させる。
  4. オープンカラムにレジンを回収し、洗浄バッファー 25mLでカラムを洗浄する。
  5. 溶出バッファー3mLで6×ヒスチジン融合GFPを溶出させる。
  6. 各溶出サンプルをスーパーセップ™エース,10-20%,17well(コードNo. 198-15041 )にてSDS-PAGE、CBB染色を行う。

洗浄バッファー: 20mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate (pH7.4), 500mmol/L Sodium Chloride, 10mmol/L Imidazole
溶出バッファー: 20mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate (pH7.4), 500mmol/L Sodium Chloride, 25-500mmol/L Imidazole

試薬に対する安定性

本品は、下記記載の濃度まで安定性です。

還元剤 30mmol/L Reduced gultathione
20mmol/L β-Mercaptoethanol
10mmol/L DTT
10mmol/L DTE
0.3% SDS
変性剤 8mol/L Urea
6mol/L Guanidine Hydrochloride
界面活性剤 2% Triton® X-100
2% Tween® 20
他添加剤 50% Glycerol
1mmol/L EDTA
20% Ethanol

TritonはDow Chemical Companyの登録商標です。
TweenはICI Americas, Inc. の登録商標です。

製品性能

製 品 Ni-NTA アガロース HP
ゲルマトリックス 6%高度架橋アガロース
リガンド ニトリロ三酢酸(NTA)
タンパク質結合容量 ≧60mg/mL gel *1
ニッケル結合容量 ≧15μmol Ni2+ / mL gel
ビーズサイズ 50-150μm
保存液 20%エタノールの50%懸濁液
FPLC 対応
最大流速 1,800cm/h or 60mL/min *2
用途 自然落下法(オープンカラム)バッチ法、FPLC

*1 6×His 融合GFP(26kD)の場合です
*2 ベッド高15cmカラム径16mmの場合です

推奨バッファー

  • 非変性条件:
  •  平衡化バッファー: 50mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate, 300mmol/L Sodium Chloride, 10mmol/L Imidazole, pH 8.0

     洗浄バッファー: 50mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate, 300mmol/L Sodium Chloride, 20mmol/L Imidazole, pH 8.0

     溶出バッファー: 50mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate, 300mmol/L Sodium Chloride, 250mmol/L Imidazole, pH 8.0

  • 変性条件:
  •  平衡化バッファー: 50mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate, 300mmol/L Sodium Chloride, 10mmol/L Imidazole, 8mol/L Urea, pH 8.0

     洗浄バッファー: 50mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate, 300mmol/L Sodium Chloride, 20mmol/L Imidazole, 8mol/L Urea, pH 8.0

     溶出バッファー: 50mmol/L Sodium Dihydrogenphosphate, 300mmol/L Sodium Chloride, 250mmol/L Imidazole, 8mol/L URea, pH 8.0

    ※EDTAやくえん酸を含まないバッファーを使用して下さい。

製品紹介

コードNo. 品 名 規 格 容 量 希望納入価格はこちら
new
149-09684
refrigerator Ni-NTA Agarose HP 遺伝子研究用 2mL (NET 1mL)
145-09681 10mL (NET 5mL)
141-09683 100mL (NET 50mL)

*製品コード、もしくは ● をクリックするとSiyaku.comにリンクしますので、現在の価格、在庫はそちらからご確認下さい。

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149-07984 100mL
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038-19791 refrigerator Cu-Agarose 遺伝子研究用 5mL
263-01871 refrigerator Zn-Agarose 遺伝子研究用 5mL

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抗体ビーズ・モノクローナル抗体

コードNo. 品 名 規 格 容 量 希望納入価格はこちら
019-23391 refrigerator Anti 6×Histidine Antibody Beads 免疫化学用 2mL (NET 1mL)
015-23393 10mL (NET 5mL)
011-23091 freeze Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9C11) 免疫化学用 200μg
015-23094 1mg
011-23096 5mg 照会
017-23211 refrigerator Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(21-48) 免疫化学用 200μg
011-23214 1mg
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018-23224 1mg
010-21861 freeze Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9F2) 免疫化学用 200μg
014-21864 1mg
010-21866 5mg 照会

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HRP標識モノクローナル抗体

コードNo. 品 名 規 格 容 量 希望納入価格はこちら
010-23181 freeze Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9C11), Peroxidase Conjugated 免疫化学用 100μL
014-23184 500μL
013-23171 freeze Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9F2), Peroxidase Conjugated 免疫化学用 100μL
017-23174 500μL

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refrigerator・・・2〜10℃保存   freeze・・・-20℃保存   -80 degree C・・・-80℃保存   表示がない場合は室温保存です。
特定毒物・・・特定毒物   毒物1 毒物2・・・毒物   劇物1 劇物2 劇物3・・・劇物   毒薬・・・毒薬   劇薬・・・劇薬   危険物・・・危険物   向精神薬・・・向精神薬
特定麻薬向精神薬原料・・・特定麻薬向精神薬原料   化審法 第一種特定化学物質・・・化審法 第一種特定化学物質   化審法 第二種特定化学物質・・・化審法 第二種特定化学物質
化学兵器禁止法 第一種指定物質・・・化学兵器禁止法 第一種指定物質   化学兵器禁止法 第二種指定物質・・・化学兵器禁止法 第二種指定物質
カルタヘナ・・・カルタヘナ   覚せい剤取締法・・・覚せい剤取締法   国民保護法・・・国民保護法

*掲載内容は、2016年2月時点での情報です。上記以外の法律および最新情報は、siyaku.com(http://www.siyaku.com/)をご参照下さい。

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表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
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